New insights from molecular characterization of the tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus in Brazil / Novos pontos de vista sobre a caracterização molecular em carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus, no Brasil

Abstract The Rhipicephalus (Boophilus) microplus complex currently consists of five taxa, namely R. australis, R. annulatus, R. (B.) microplus clade A sensu, R. microplus clade B sensu, and R. (B.) microplus clade C sensu. Mitochondrial DNA-based methods help taxonomists when they are facing the morpho-taxonomic problem of distinguishing members of the R. (B.) microplus complex. The purpose of this study was to perform molecular characterization of ticks in all five regions of Brazil and infer their phylogenetic relationships. Molecular analysis characterized 10 haplotypes of the COX-1 gene. Molecular network analysis revealed that haplotype H-2 was the most dispersed of the studied populations (n = 11). Haplotype H-3 (n = 2) had the greatest genetic differentiation when compared to other Brazilian populations. A Bayesian phylogenetic tree of the COX-1 gene obtained strong support. In addition, it was observed that the population of R. (B.) microplus haplotype H-3 exhibited diverging branches among the other Brazilian populations in the study. The study concludes that the different regions of Brazil have R. (B.) microplus tick populations with distinct haplotypes.

Resumo Carrapatos do complexo R. (B.) microplus se distribuem em cinco taxa: R. australis, R. annulatus, R. (B.) microplus clado A sensu R. microplus clado B sensue e R. (B.) microplus clado C sensu. Métodos baseados no DNA mitocondrial podem auxiliar taxonomistas quando há dificuldades em estabelecer diferenças morfológicas para distinguir membros do complexo R. (B.) microplus. O objetivo deste estudo foi a caracterização molecular e a inferência de relações filogenéticas em carrapatos de todas as cinco regiões geográficas do Brasil. Para o gene COX-1, a análise molecular caracterizou 10 haplótipos. Na análise molecular em rede foi observado que o haplótipo H-2 é o mais disperso entre as populações (n=11). O haplótipo H-3 (n=2) foi o que obteve maior diferenciação genética ao ser comparado com outras populações brasileiras. A árvore filogenética Bayesiana de gene COX-1 gerou suporte robusto e foi observado que a população de R. (B.) microplus haplótipo H-3 apresentou ramificação com divergência entre as outras populações brasileiras apresentadas neste estudo. Conclui-se que as populações brasileiras possuem diversidade haplotípica com divergência entre as diversas populações de R. (B.) microplus no Brasil.

Evaluation of Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) resistance to different acaricide formulations using samples from Brazilian properties / Avaliação da resistência de Rhipicephalus (Boophilus) microplus (Acari: Ixodidae) a diferentes formulações acaricidas utilizando amostras de propriedades brasileiras

Abstract The Rhipicephalus (Boophilus) microplus tick is responsible for considerable economic losses in Brazil, causing leather damage, weight loss and reduced milk production in cattle and results in the transmission of pathogens. Currently, the main method for controlling this tick is using acaricides, but their indiscriminate use is one of the major causes of resistance dissemination. In this study, the adult immersion test (AIT) was used to evaluate resistance in ticks from 28 properties located in five different states (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Ceará, São Paulo, e Minas Gerais) and the Distrito Federal (DF) of Brazil. The resistance was found in 47.64% of the repetitions demonstrating an efficacy of less than 90% in various locations throughout the country. The larvae packet test was used to evaluate samples from ten properties in four states (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Minas Gerais and Espírito Santo). Spray products belonging to the main classes of acaricides, including combination formulations, were used in both types of test. New cases of resistance were found on properties within the states of Ceará, Espírito Santo and Mato Grosso, where such resistance was not previously reported.

Resumo O carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus é responsável por consideráveis perdas econômicas no Brasil, causando, nos bovinos, danos ao couro, perda de peso, redução na produção de leite, o que resulta na transmissão também de patógenos. Atualmente, o principal método de controle para esse carrapato é o uso de acaricidas, porém seu uso indiscriminado é uma das principais causas da disseminação da resistência. Neste estudo, o teste de imersão de adultos (TIA) foi utilizado para avaliar a resistência em carrapatos provenientes de 28 propriedades, localizadas em cinco diferentes estados brasileiros (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Ceará, São Paulo, e Minas Gerais) e no Distrito Federal (DF). A resistência foi encontrada em 47,64% das repetições, demonstrando uma eficácia de menos de 90% em vários lugares do país. O teste de pacote de larva foi utilizado para avaliar amostras de 10 propriedades em quatro estados (Mato Grosso do Sul, Mato Grosso, Minas Gerais e Espírito Santo). Produtos de pulverização, pertencentes às principais classes de acaricidas, incluindo-se associações, foram utilizados em ambos os testes. Novos casos de resistência foram encontrados em propriedades nos estados do Ceará, Espírito Santo e Mato Grosso, nas quais a resistência ainda não havia sido previamente reportada.

Detection of Babesia spp. in Free-Ranging Pukus, Kobus vardonii, on a Game Ranch in Zambia

Babesia spp. were detected from 4 asymptomatic pukus captured on a game ranch in central Zambia in October 2008. Blood smears were examined in 4 species of aymptomatic free-ranging antelopes, namely the puku (Kobus vordanii), reedbuck (Redunca arundinum), bushbuck (Tragelaphus sylvaticus), and kudu (Tragelaphus strepsiceros), and showed the presence of Babesia parasites only in the puku. In the puku, the prevalence of babesiosis was estimated at 33.3% (n=12), while the overall prevalence in all examined animals was 8.5% (n=47). The parasites showed morphological characteristics of paired ring-like stages with the length varying between 1.61 microm and 3.02 microm (mean=2.12 microm, n=27; SD=0.76 microm). Both the infected and non-infected pukus showed good body condition scores (BCS), while the dominant tick species detected from all animals were Rhipicephalus appendiculatus, Rhipicephalus spp., and Boophilus spp. To our knowledge this is the first report of Babesia spp. infection in pukus in Zambia. These findings suggest that wildlife could play an important role in the epidemiology of babesiosis in Zambia.

Comparison of efficiency and reproductive aptitude indexes between a reference and field strains of the cattle tick Rhipicephalus (Boophilus) microplus, in Sinaloa, Mexico / Comparação dos índices de eficiência e aptidão reprodutiva entre uma cepa de referência e outra de campo do carrapato do gado, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, em Sinaloa, México

The objective of this work was to study the reproductive behavior of two strains of R. (B.) microplus, one wild-caught (Native) and one reference strain (Media Joya) for two years, measuring the reproductive efficiency index (REI) and reproductive aptitude index (RAI). Engorged ticks from each strain were collected monthly from February 2002 to February 2004. These were weighed and kept in the laboratory until egg-laying. Oogenic masses were individually weighed and incubated until larvae emergence. REI and RAI were calculated from each sample, grouping ticks by weight in 100 mg range classes. An analysis of variance and Duncan's multiple rank tests were carried out on the data (P < 0.05). Pearson's correlation coefficients were estimated (P < 0.01) in order to determine the relationship between engorgement weight and the weight and number of laid and hatched eggs. The Native strain showed a higher engorgement weight than Media Joya strain. In both strains REI and RAI were similar in all weight classes; with a quadratic tendency in Media Joya and linear-quadratic in the Native strain (P < 0.05). Significant differences where observed when REI and RAI of both strains were compared along the duration of the study (P < 0.01) with the Native strain performing better in both indexes, including better performance during the dry season. All parameters studied showed highly significant correlation; eggs laid and eggs hatched were notably highly correlated, 0.94 and 0.91, for Media Joya strain and Native strain respectively.

O objetivo deste trabalho foi estudar a conduta reprodutiva de duas cepas de R. (B.) microplus, uma coletada no campo (Nativa) e outra de referência (Média Jóia), por dois anos, calculando o índice de eficiência reprodutiva (REI) e o índice de aptidão reprodutiva (RAI). Foram coletados mensalmente carrapatos fêmeas engurgitadas de cada cepa no período de Fevereiro de 2002 a Fevereiro de 2004. Estas foram pesadas e conservadas no laboratório até ovipositar. As massas de ovos foram pesadas individualmente e incubadas até a eclosão das larvas. O REI e o RAI foram calculados para cada coleta, agrupando os carrapatos em classe de peso de 100 mg. Os dados foram submetidos a uma análise de variância e prova de classe múltipla de Duncan (P < 0,05). Foram calculados os coeficientes de correlação de Pearson (P < 0,01) para estimar a associação entre o peso dos carrapatos engurgitados e o peso e número de ovos postos e eclosionados. A cepa Nativa mostrou um peso ao engurgitamento mais alto do que a cepa Média Jóia. Os valores de REI e de RAI em ambas cepas foram similares em todos as classes de peso, mostrando tendência cuadrática na Média Jóia e linear-cuadrática na cepa Nativa (P < 0,05). Ambos os índices por classe de peso no engurgitamento foram sempre mais altos na cepa Nativa (P < 0,05). Os valores de REI e de RAI de ambas cepas ao longo do estudo mostraram diferenças (P < 0,01), sendo a cepa Nativa a de melhor desempenho em ambos índices, incluindo um melhor desenvolvimento durante a estação seca. Observou-se uma correlação altamente significativa em todos os parâmetros, sobressaindo o número de ovos postos com o número de ovos eclodidos, 0,94 e 0,91, para a cepa Média Jóia e a Nativa, respectivamente.